Род morbillivirus вирус кори

Условные сокращения

ВИЧ – вирус иммунодефицита человека

ВОЗ – Всемирная организация здравоохранения

РНК – рибонуклеиновая кислота

ТЦД – тканевая цитопатическая доза

ФГУП – Федеральное государственное унитарное предприятие

CDV – вирус собачьей чумы (Canine distemper virus)

DC-SIGN – мембран-ассоциированная молекула адгезии дендритных клеток (dendritic cell-specific intercellular adhesion molecule-3 grabbing non-integrin)

HTLV1 – человеческий Т-клеточный лимфотропный вирус 1-го типа (human T-lymphotropic virus type 1)

MCP – мембранный кофакторный белок (membrane cofactor protein)

MeV – вирус кори (Measles virus)

NK-1 – рецептор нейротоксина-1

PPRV – вирус чумы мелких жвачных животных (Peste des petits ruminants virus)

RPV – вирус чумы крупного рогатого скота (Rinderpest virus)

SAP – SLAM-ассоциированный белок (SLAM-associated protein)

SCR – короткие повторяющиеся фрагменты (short consensus repeats)

SLAM – сигнальная молекула активации лимфоцитов (signaling-lymphocyte-activation molecule)

TCR – T-клеточный рецептор (T-cell receptor)

Введение

В настоящее время корь остается одной из основных причин смертности среди детей раннего возраста (Duke T. [et al.], 2003). По оценкам специалистов, за последние 150 лет во всем мире от кори погибло около 200 млн человек (Torrey E. F. [et al.], 2005).

Корь — вирусное, высококонтагиозное, антропонозное, инфекционное заболевание, сопровождающееся пятнисто-папулезной сыпью, лихорадкой, респираторными и желудочно-кишечными проявлениями. Развитие вирусной инфекции приводит к индукции тяжелой иммуносупрессии и часто к смертельному исходу в результате таких осложнений, как пневмония и энцефалит (Griffin D. E., 2007).

Английское название болезни «measles» происходит от латинского слова «misellus», что означает «жалкий, несчастный». Иногда это заболевание называют «rubeola» (от лат. rubeolus – красноватый) или «morbilli» (от лат. morbus – болезнь). Корь известна с VI века н. э. Первое описание кори принадлежит персидскому врачу Razi (или Abu Bakr Razi) (860 – 932) в труде «Об оспе и кори» (Harminder S. D. [et al.], 2008). В европейской литературе заболевание получило название «morbilli», в отличие от «ilmorbo» – чума (Агафонов А. П. [и др.], 2005).

В 1911 году J. F. Anderson и J. Goldberger доказали вирусную этиологию кори (Anderson J. F. [et al.], 1911). Выделить сам вирус удалось исследователям J. F. Enders и T. C. Peebles только в 1954 году от больного корью 11-летнего мальчика из США по имени David Edmonston (Enders J. F. [et al.], 1954).

Выделенный штамм вируса кори был назван «Edmonston» и в дальнейшем адаптирован к репродукции в амниотической полости куриных эмбрионов. Путем многократного пассирования вируса в 1963 г. была получена лицензированная живая аттенуированная Edmonston B вакцина (Griffin D. E., 2007), вызывающая стойкий иммунный ответ, но не стимулирующая иммуносупрессию.

Распространение вирусов кори

Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) 2010 год был объявлен годом борьбы с корью и краснухой в Европе. Однако, несмотря на все усилия, по оценкам ВОЗ, в 2011 году от кори умерло 158 000 человек – почти 430 случаев в день, или 18 случаев в час. Большинство случаев заболевания зарегистрированы среди детей в странах с низким уровнем дохода, со слабыми системами здравоохранения (Корь, 2013).

Дети первого года жизни получают защитный врожденный иммунитет от вакцинированной или переболевшей корью матери, такой иммунитет сохраняется до 15 мес. жизни ребенка. До появления вакцины вирус кори чаще всего поражал детей в возрасте от 2 до 10 лет, в настоящее время – от 5 до 14 лет. Так, в России в первой половине 1990-х годов дети в возрасте до 14 лет составляли свыше 70 % общего числа больных корью, сейчас эта цифра не превышает 40 – 50 %. «Повзросление» заболевания, вероятно, связано с увеличением доли лиц с низким титром специфических антител к вирусу кори в этой возрастной группе (Агафонов А. П. [и др.], 2005).

Систематика семейства Paramyxoviridae

Возбудитель кори Morbillivirus принадлежит к порядку Mononegavirales, семейству Paramyxoviridae, роду Morbillivirus, включающему в себя: вирус кори Measles virus (MeV), вирус чумы крупного рогатого скота Rinderpest virus (RPV), вирус собачьей чумы Canine distemper virus (CDV), вирус чумы мелких жвачных животных Peste des petits ruminants virus (PPRV).

Строение вируса кори MeV

Представитель рода Morbillivirus, или MeV, – сложно организованный вирус, его диаметр составляет от 150 до 350 нм (рис. 1), это наиболее крупный РНК-содержащий вирус человека и животных. Белковый капсид вируса устроен по икосаэдрическому типу симметрии и содержит геном, представленный одной линейной отрицательной нитью рибонуклеиновой кислоты (РНК) – 1Н(–)РНК.

Геном вируса состоит из 15 894 пар оснований. Его молекулярная масса 5,2 % 106– 5,6 % 106 Да. РНК составляет от 0,5 до 3,0 % от сухой массы вириона и в чистом виде не обладает инфекционной активностью.

В геноме вируса закодирована информация о шести структурных белках: белок M (матричный белок), два гликопротеина (гемагглютинин НN и белок слияния F), два ассоциированных с РНК-полимеразой белка (фосфопротеин P и большой белок L) и нуклеокапсидный белок N, который инкапсулирует вирусную РНК (рис. 2).

Рис. 1. Схема строения Morbillivirus. Вирусная частица состоит из рибонуклеопротеинового комплекса: нуклеокапсид (геномная РНК и белок N) и вирусная РНК-полимераза (белки P и L); и оболочки, состоящей из белков M, F, H, встроенных в мембрану клетки-хозяина: 1 – белок слияния (F); 2 – гемагглютинин (HN); 3 – матричный белок (М); 4 – нуклеопротеин (N); 5 – полимераза (L); 6 – фосфопротеин (P)

Белок HN обладает функциями гемагглютинина и нейраминидазы и служит для прикрепления вируса MeV к специфическим рецепторам чувствительной клетки на первом этапе инфекции. HN имеет вариабельный участок и присутствует на поверхности вириона как тетрамер, состоящий из двух ковалентно связанных димеров (Hardwick J. M. [et al.], 1978; Plemper R. K. [et al.], 2000).

Рис. 2. Строение генома Morbillivirus (ViralZone. [S. a.])

Связывание рецептора на поверхности клеток и белка HN приводит к активации белка F, отвечающего за слияние мембраны вируса и клетки-мишени (Griffin D. E., 2007). Белок F синтезируется в виде белка-предшественника F0, состоящего из белков F1 иF2. N-конец белка F1, являясь гидрофобным, включает 10 – 15 нейтрально заряженных аминокислот и обусловливает слияние вирусной и клеточной мембран при проникновении вируса в клетку. При заражении ряда чувствительных клеток белок F Morbillivirus вызывает их слияние, инициируя образование гигантских многоядерных клеток (рис. 3). Подобный эффект является результатом типичного цитопатического действия вируса кори на клетки. При кори в фолликулах лимфатических узлов обнаруживают гигантские многоядерные клетки Уортина – Финкельдея. Подобные клетки, содержащие включения в ядрах и цитоплазме, были впервые выявлены в XX веке американским и немецким патологоанатомами A. S. Warthin и W. Finkeldey.

Характерный цитопатический эффект был выявлен на пятые сутки на этапе заражения во флаконе с пробой мононуклеаров периферической крови. Он выражался в образовании гигантских многоядерных клеток – симпластов, включающих до 100 ядер, с последующей деструкцией и формированием крупных полостей типа мыльных пузырей.

Рис. 3. Интактные клетки линии Vero-SLAM (а) и цитопатическое действие вируса AIK-HDC на клетки Vero-SLAM (б) (Haratian K. [et al.] 2007)

Белок М (см. рис. 2) (мембранный, или матриксный) играет важную роль в развитии вирусной инфекции (Cathomen T. [et al.], 1998) и регуляции транскрипции (Suryanarayana K. [et al.], 1994). Он встроен с внутренней стороны в липопротеиновую мембрану Morbillivirus. Белок М стабилизирует вирусную частицу и является медиатором ее сборки (Hirano A., 1992; Riedl P. М. [et al.], 2002).

Ген P кодирует дополнительные белки V и С. Считается, что они являются антагонистами интерферона (Palosaari Н. [et al.], 2003; Shaffer J. A. [et al.], 2003; Takeuchi K. [et al.], 2003; Yokota S.

[et al.], 2003).

Репродукция MeV

После проникновения вируса в цитоплазму клетки-мишени путем слияния с клеточной мембраной происходит его раздевание и высвобождение вирусной РНК. Далее следует репликация на первом этапе: с помощью РНК-зависимой РНК-полимеразы происходит транскрипция антисенс-цепи вирусной РНК в информационную иРНК; далее синтезируются дополнительные копии (+)РНК, служащие матрицами для синтеза геномных (–)РНК. Репликация геномных (–)РНК вируса осуществляется в цитоплазме.

Формирование нуклеокапсида происходит за счет специфического узнавания белками определенных участков на молекуле генома и белок-белкового узнавания, приводящего к самосборке структуры вириона. Нуклеокапсид подходит к тем участкам плазматической мембраны, на которых с наружной стороны уже встроены вирусные гликопротеины, а с внутренней стороны – белок М. Готовые вирусные частицы отпочковываются от клетки, захватывая часть ее мембраны.

1. Род морбилливирус: вирус кори, биологические свойства.

Выполнила: Мухамадиева Г.М.
Б-ГЕН 31-15

2. Род Morbillivirus

– род РНК-содержащих вирусов семейства
парамиксовирусов, который включает в себя
4 вида вирусов:
• вирус кори
• вирус чумы крупного рогатого скота
• вирус собачьей чумы
• вирус чумы мелких жвачных животных;

3. Вирус кори( от лат. «misellus» – жалкий, несчастный).

Вирус кори( от лат. «misellus» жалкий, несчастный).
• Корь известна с VI века н. э. Первое описание кори
принадлежит персидскому врачу Razi (или Abu
Bakr Razi) (860 – 932) в труде «Об оспе и кори».
• Был выделен в 1954 году Д.Эндерсом и
Т.Пиблесом.
• Возбудитель кори принадлежит к порядку
Mononegavirales, семейству Paramyxoviridae, роду
Morbillivirus.

4. Вирус кори

5. Вирус кори под электронным микроскопом.

6. Строение Вируса Кори MeV (Measles virus).

• сложно организованный вирус, d= от 150 до
350 нм, наиболее крупный РНК-содержащий
вирус человека и животных.
• Белковый капсид вируса имеет
икосаэдрический тип симметрии.
• Геном представлен одноцепочечной
нефрагментированной (-) РНК, состоит из 15
894 пар оснований. Репликация вируса
происходит в цитоплазме клеток и не зависит
от функций ядра.

7. Схема строения Morbillivirus

Вирусная частица
состоит из
рибонуклеопротеиново
го комплекса:
• нуклеокапсид
(геномная РНК и
белок N) и вирусная
РНК-полимераза
(белки P и L)
• и из оболочки,
состоящей из белков
M, F, H, встроенных в
мембрану клеткихозяина: 1 – белок
слияния (F); 2 –
гемагглютинин (HN);
3 – матричный белок
(М); 4 –
нуклеопротеин (NР);
5 – полимераза (L); 6
– фосфопротеин (P)

8. Строение генома вируса кори.

9.

• В геноме вируса закодирована информация о
шести структурных белках:
1. белок M (матричный белок);
2. гемагглютинин НN и белок слияния F
(гемаглютинины);
3. фосфопротеин P и большой белок L (белки,
ассоциированные с РНК-полимеразой);
4. нуклеокапсидный белок NР(инкапсулирует
вирусную РНК).

10.

• Белок HN обладает функциями гемагглютинина
и нейраминидазы, служит для прикрепления
вируса MeV к специфическим рецепторам
чувствительной клетки на первом этапе
инфекции;
• Связывание рецептора на поверхности клеток и
белка HN приводит к активации белка F,
отвечающего за слияние мембраны вируса и
клетки-мишени;
• Белок М (мембранный, или матриксный) играет
важную роль в развитии вирусной инфекции и
регуляции транскрипции. Он встроен с
внутренней стороны в липопротеиновую
мембрану вируса, стабилизирует вирусную
частицу и является медиатором ее сборки.
• Ген P кодирует дополнительные белки V и С.
Считается, что они являются антагонистами
интерферона.

11. Эпидемиология

• острая
инфекционная
болезнь,
характеризующаяся лихорадкой, катаральным
воспалением слизистых оболочек верхних
дыхательных путей и глаз, а также пятнистопапулезной сыпью на коже.
• Корь распространена повсеместно, а в некоторых
странах она эпидемична.
• Источник инфекции – больной корью человек.
• Основной путь инфицирования — воздушнокапельный, реже — контактный.
• Вирус кори нестоек во внешней среде,
чувствителен
к
инсоляции,
высоким
температурам и быстро разрушается при
действии дезинфектантов и детергентов.

12. Патогенез кори

• Возбудитель проникает через слизистые
оболочки верхних дыхательных путей и глаз,
откуда попадает в подслизистую оболочку,
лимфатические узлы. После репродукции он
поступает в кровь (вирусемия) и поражает
эндотелий кровеносных капилляров, обуславливая тем самым появление сыпи.
Развиваются отек и некротические изменения
тканей.

13. Клинические проявления

• Инкубационный
период
8-15
дней.
Вначале
отмечаются острые респираторные проявления
(ринит,
фарингит,
конъюнктивит,
фотофобия,
температура тела 39С). Затем, на 3—4-й день, на
слизистых оболочках и коже появляется пятнистопапулезная сыпь, распространяющаяся сверху вниз:
сначала на лице, затем на туловище и конечностях. За
сутки до появления сыпи на слизистой оболочке щек
появляются мелкие пятна, окруженные красным
ореолом. Заболевание длится 7—9 дней, сыпь
исчезает, не оставляя следов.
• Возбудитель
вызывает
аллергию,
подавляет
активность Т-лимфоцитов и иммунные реакции, что
способствует появлению осложнений в виде
пневмоний, воспаления среднего уха и др. Редко
развиваются энцефалит и ПСПЭ.

14.

15. Диагностика кори

• Исследуют смыв с носоглотки, соскобы с
элементов сыпи, кровь, мочу. Вирус кори
можно обнаружить в патологическом
материале и в зараженных культурах клеток с
помощью РИФ(реакция иммунной
флюоресценции ), РТГА(реакция торможения
гемагглютинации) и реакции нейтрализации.
Характерно наличие многоядерных клеток и
антигенов возбудителя в них.
• Для серологической диагностики применяют
РСК(реакция связывания комплемента), РТГА
и реакцию нейтрализации.

16. Лечение

• Средства специфической терапии кори
отсутствуют,
симптоматическое
лечение
оказывает благоприятный эффект.
• В настоящее время для специфической
профилактики кори применяется живая
аттенуированная
вакцина.
Вакцинацию
проводят однократно, подкожно.
• Вакцинацией
удается
добиться
формирования иммунитета на 10-15 лет.
• После перенесенной кори развивается
гуморальный
стойкий
пожизненный
иммунитет. Повторные заболевания редки.

17. Вакцинация

• Коревая вакцина относится к аттенуированным
препаратам (содержит живые, но ослабленные
вирусы);
При
введении аттенуированной вакцины в
организме происходят те же иммунные изменения,
что и при заражении вирусом, но не возникает
клинических симптомов заражения больного.
• Прививку от кори делают младенцам после 12
месяцев.
• Иногда не формируется устойчивость организма
и при прививке в 15 месяцев. Чтобы исключить
такую возможность, детям проводят повторную
вакцинацию в 6 лет.

РодMorbillivirus включает вирусы кори, подострого склерозируещего панэнцефалита, чумы крупного рогатого скота и собак. Типовой вирус – вирус кори. Вирусная природа заболевания доказана Д. Эндерсом в 1911 г.

Свойства.Вирус содержит (-)РНК; размеры 120-250 нм; не имеет фермента нейраминидазы; на поверхности суперкапсида гемагглютинин расположен гнездно и не в каждой ворсинке (рис. 23); гемагглютинация происходит только с эритроцитами обезьян; при размножении в культуре ткани образует многоядерные симпласты и синцитий, а также клетки с включениями в цитоплазме и ядре; вызывает гемадсорбцию и бляшкообразование.

Резистентность. В окружающей среде вирус быстро погибает под действием прямого солнечного света, УФ-лучей, поэтому дезинфекцию при кори не проводят.

Восприимчивость животных. Типичную картину коревой инфекции удается воспроизвести только на обезьянах.

Антигенная структура вируса. Существующие штаммы принадлежат к одному серологическому варианту. Основные АГ вируса – гемагглютинин (Н), пептид F (представлен мажорным и минорным белками) и нуклеокапсидный белок (NP).

Эпидемиология: корью болеет только человек. Восприимчивость к кори невакцинированных детей – 100%. Заболевание возникает в виде эпидемий, чаще в детских невакцинированных коллективах. Могут болеть и невакцинированные взрослые люди. Больной человек заразен в конце инкубационного периода и в первые дни высыпаний.

Механизм передачи – воздушно-капельный.

Патогенез. Первоначально вирус размножается в эпителии верхних дыхательных путей и регионарных лимфатических узлах, затем проникает в кровоток. Вирусемия носит кратковременный характер и развивается на 3-5 сутки инкубационного периода. Возбудитель гематогенно разносится по всему организму, фиксируется в РЭС.

Разрушение инфицированных клеток приводит к высвобождению вируса и развитию второй волны вирусемии. Тропность возбудителя к эпителиальным клеткам приводит к вторичному инфицированию конъюнктивы, слизистых оболочек дыхательных путей и полости рта.

Циркуляция вируса в крови и иммунные реакции обусловливают повреждение стенок сосудов, отек тканей, некротические изменения в органах.

Клинические проявления. Инкубационный период составляет 8-20 суток, в течение которых вирус размножается в эпителии дыхательных путей и ассоциированных лимфоидных тканях. Затем наступает вирусемия, которую сопровождают продромальные симптомы, протекающие по типу острого респираторного заболевания (ОРЗ): острое начало, температура 39оС, головные боли; наблюдается конъюнктивит с выраженной светобоязнью, вплоть до блефароспазма. Через 5 дней, за 24-36 ч до появления сыпи, во рту на слизистой оболочке щек появляются пятна Филатова-Коплика (инфильтраты воспаления). Папулезная сыпь появляется за ушами, на лице, туловище, конечностях. Появление сыпи – это васкулит – проявление действия иммунных комплексов на сосудистую стенку. Возбудитель кори вызывает слияние клеток, что обусловлено экспрессией F белка на их мембранах, образуется синцитий.

Осложнения коревой инфекции: вирусные бронхопневмонии и воспаление среднего уха, часто осложняющиеся бактериальной инфекцией; гигантоклеточная пневмония (возможна у больных с возникшими иммунодефицитами); энцефалиты.

Иммунитет после заболевания или вакцинации стойкий, пожизненный. Пассивный иммунитет сохраняется до 6 месяцев (антитела матери IgG).

Лабораторная диагностика. Материал для исследования – отделяемое из носоглотки, соскобы с кожи из участков сыпи, кровь, моча, в летальных случаях – мозговая ткань.

Экспресс диагностика основана на обнаружении специфического антигена методом РИФ, а также антител IgМ в ИФА.

Вирусологический метод. Для выделения вируса используют культуру клеток. Индикацию проводят по наличию симпластов и синцития, а также клеток с зернистыми включениями в ядре и цитоплазме. Идентификацию выделенного вируса проводят с помощью РИФ, РТГА, РН в культуре клеток.

Серологический диагноз. Ставят РН, РСК, РТГА с парными сыворотками.

Специфическая профилактика. Проводится живой аттенуированной вакциной тримовакс, в которой коревая вакцина представлена ослабленным штаммом Шварц. Вакцинацию проводят детям в 12 месяцев.

Для лечения больных и контактным лицам назначают противокоревой иммуноглобулин, который получают из плацентарной или абортной крови. Он содержит АТ против кори, а также против вирусов гриппа, гепатита, полиомиелита, коклюша. Назначают детям старше 3-х месяцев.