Маркеры неспецифического язвенного колита

[13-121]
Комбинированное обследование при воспалительных заболеваниях кишечника

6950 руб.

Комбинированное обследование при воспалительных заболеваниях кишечника – комплекс исследований, направленных на выявление в крови пациента антител, в определенной степени характерных для неспецифического язвенного колита или болезни Крона.

Синонимы русские

Комплексное серологическое исследование на маркеры воспалительных заболеваний кишечника.

Синонимы английские

Serologic markers for IBD, serological testing for Inflammatory Bowel Disease, IBD differentiation panel.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Хронические воспалительные заболевания кишечника – это собирательный термин, объединяющий два заболевания – неспецифический язвенный колит и болезнь Крона. Также в эту группу относят недифференцированный колит – диагноз, который ставится, когда провести достоверное разграничение НЯК и БК невозможно. Эти заболевания патогенетически характеризуются деструктивным аутоиммунным воспалением кишечной стенки.

Важнейшая составляющая дифференциальной диагностики воспалительных заболеваний кишечника состоит в разграничении неспецифического язвенного колита и болезни Крона, так как есть некоторые различия в лечебной тактике, а также в частоте развития осложнений при этих двух заболеваниях. На данный момент наряду с эндоскопическим и патоморфологическим исследованием в диадиагностике НЯК и БК могут применяться и серологические маркеры, с определенной частотой встречающиеся при этих заболеваниях. К ним относятся антитела к цитоплазме нейтрофилов, антитела к пекарским дрожжам Saccharomyces cerevisiae и антитела к бокаловидным клеткам кишечника. Наличие и отсутствие этих антител при комплексном исследовании с высокой вероятностью позволяет дифференцировать одно из двух воспалительных заболеваний кишечника.

Антинейтрофильные цитоплазматические антитела (ANCA) – антитела к компонентам цитоплазмы нейтрофилов, чаще всего к содержимому их гранул. Выявляются при многих системных заболеваниях, в том числе и при воспалительных заболеваниях кишечника. Могут быть представлены IgG или IgA.

Основным методом определения ANCA является реакция непрямой иммунофлюоресценции, которая позволяет не только выявлять титр антител, но и дифференцировать основные типы флюоресцентного свечения. Выделяют два основных типа свечения ANCA – цитоплазматический (светятся гранулы в цитоплазме клетки) и перинуклеарный (p-ANCA). При перинуклеарном типе свечение очерчивает доли ядра лейкоцита, однако само ядро остается неокрашенным. Кроме двух основных типов свечения, может быть отмечен атипичный вариант перинуклеарного свечения – характеризуется широким неоднородным окрашиванием периферии ядра клетки. Выявление атипичного варианта свечения характерно для воспалительных заболеваний кишечника.

Антитела к пекарским дрожжам Saccharomyces cerevisiae (ASCA) – антитела к углеводным компонентам клеточной стенки пекарских дрожжей – естественному антигену пищи. Могут быть представлены IgG или IgA. В отличие от ANCA, они не являются аутоантителами, так как направлены скорее на антигены грибов, а не собственного организма.

Антитела к бокаловидным клеткам кишечника (АБК). Бокаловидные клетки кишечника производят муцин, функция которого состоит в увлажнении слизистой оболочки кишечника. Муцин является основным антигеном для АБК. Эти антитела скорее всего играют определенную роль в патогенезе неспецифического язвенного колита, так как расположение воспалительного поражения кишечника при НЯК отражает анатомическое распределение бокаловидных клеток в кишечнике. В то же время АБК выявляются не у всех больных НЯК. Стандартный метод выявления АБК – реакция непрямой иммунофлюоресценции.

Для чего используется исследование?

• Для дифференциальной диагностики неспецифического язвенного колита и болезни Крона, прежде всего при невозможности применить эндоскопические и патоморфологические методы исследования, а также при низкой их информативности.

Когда назначается исследование?

• При наличии клинических симптомов поражения ЖКТ в рамках воспалительного заболевания кишечника, особенно в виде колита (диарея с примесью крови, тенезмы, запоры, боли при дефекации, повышение температуры тела, потеря веса).

Что означают результаты?

Референсные значения

1. Антитела к цитоплазме нейтрофилов, IgG (с определением типа свечения):

титр – менее 1:40;

результат – не обнаружено.

2. Антитела к Sacchаromyces cerevisiae (ASCA) классов IgG: 0 – 20 RU/ml.

3. Антитела к Sacchаromyces cerevisiae (ASCA) классов IgA: 0 – 20 RU/ml.

4. Антитела к цитоплазме нейтрофилов класса IgA (АНЦА): 

5. Антитела к бокаловидным клеткам кишечника: титр

• Положительный результат атипичных p-ANCA и отрицательный ASCA – вероятнее всего свидетельствует о наличии неспецифического язвенного колита.
• Отрицательный результат p-ANCA и положительный ASCA – с большей вероятностью указывает на болезнь Крона.
• Положительный результат АБК – серологический маркер неспецифического язвенного колита.



Важные замечания

• Положительные ASCA выявляют у 40-70 % пациентов с болезнью Крона, кроме того, они часто встречаются у родственников больных воспалительными заболеваниями кишечника. Атипичные p-ANCA встречаются в 70 % случаев неспецифического язвенного колита и в 10 % при болезни Крона. Это значит, что данные серологические маркеры не имеют исключительного значения в дифференциальной диагностике ВЗК и должны применяться в комплексе с другими исследованиями.
• Хотя антитела к бокаловидным клеткам и являются специфичным серологическим маркером неспецифического язвенного колита, они обнаруживаются не во всех случаях НЯК (только в 30-60 %). Это значит, что АБК нельзя использовать как маркер исключения – их отсутствие не означает отсутствия заболевания.
• У пациентов с ASCA болезнь Крона протекает тяжелее, с частым развитием кишечной непроходимости, но лучше отвечает на терапию ингибиторами фактора некроза опухоли альфа.
• Нет никакой связи между титром ANCA и течением неспецифического язвенного колита, титр антител остается высоким даже после удаления толстого кишечника, что является радикальной излечивающей операцией при НЯК. Титр ASCA также не зависит от активности и продолжительности течения болезни Крона и остается стабильно высоким на фоне лечения. Таким образом, эти маркеры не подходят для мониторинга заболеваний, их использование оправдано только при первичной дифференциальной диагностике НЯК и БК, исследовать их повторно в дальнейшем не имеет смысла.

Также рекомендуется

• Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой

• Скорость оседания эритроцитов

• С-реактивный белок в сыворотке крови

• Анализ кала на скрытую кровь

• Патоморфологическое исследование биоптата стенки толстой кишки

Кто назначает исследование?

Гастроэнтеролог, терапевт, врач общей практики, педиатр.

Литература

1. “Serologic markers in Inflammatory Bowel Disease” Xavier Bossuyt, Clinical Chemistry, vol. 52, issue 2, February 2006. Pages 171-181.

2. “Serologic markers of Inflammatory Bowel Disease” Andrea Tešija Kuna, Biochemia Medica, February 2013 №23 (1). Pages 28-42.

3. Клиническая лабораторная диагностика: национальное руководство: в 2 т. – T. II / Под ред. В. В. Долгова, В. В. Меньшикова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. С. 109-110, 123-124.

Определение лабораторных маркеров воспалительных заболеваний кишечника (антитела к Sacchаromyces cerevisiae и антитела к цитоплазме нейтрофилов), используемое для дифференциальной диагностики болезни Крона и неспецифического язвенного колита.

Состав исследования:

• Антитела к цитоплазме нейтрофилов, IgG (с определением типа свечения)
• Антитела к Sacchаromyces cerevisiae (ASCA) классов IgA
• Антитела к цитоплазме нейтрофилов класса IgA (АНЦА)

Синонимы русские

Серологические тесты при болезни Крона и неспецифическом язвенном колите, антитела к Sacchаromyces cerevisiae и антитела к цитоплазме нейтрофилов (АНЦА).

Синонимы английские

Inflammatory Bowel Disease, Serology panel, Anti-Saccharomyces cerevisiae antibodies (ASCA, ASCAs) and Anti-neutrophil cytoplasmic antibodies (ANCA, ANCAs).

Метод исследования

Непрямая реакция иммунофлюоресценции.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Воспалительные заболевания кишечника (ВЗК) – группа состояний, при которых наблюдается нарушение иммунного ответа организма на антигены собственного кишечника и/или антигены нормальной микрофлоры собственного кишечника. В результате этого в кишечнике развивается и поддерживается воспалительный процесс. Выделяют две основные нозологические формы ВЗК: болезнь Крона (БК) и неспецифический язвенный колит (НЯК). Несмотря на некоторую общность патогенеза и принадлежность к одной группе болезней, НЯК и БК характеризуются разным прогнозом и разной тактикой лечения. Поэтому правильная дифференциальная диагностика двух болезней имеет принципиальное значение. Дифференциальная диагностика НЯК и БК носит комплексный характер, и, как правило, включает развернутое серологическое обследование. В настоящее время наиболее широко используются следующие маркеры:

1. Антитела к цитоплазме нейтрофилов

Антитела к цитоплазме нейтрофилов (АНЦА) – это группа антител, направленных против различных компонентов нейтрофилов. Их определяют с помощью непрямой реакции иммунофлюоресценции (РНИФ). Кроме факта наличия АНЦА большое значение имеет тип свечения. Говоря о ВЗК, однако, важно различать “типичные” и “атипичные” АНЦА.

Различают два основных типа свечения АНЦА: цитоплазматический (в этом случае  говорят о наличии ц-АНЦА, или c-ANCA) и перинуклеарный (п-АНЦА, или p-ANCA). Цитоплазматический тип характеризуется зернистым, диффузным окрашиванием цитоплазмы. Показано, что основным антигеном для ц-АНЦА является протеиназа-3. “Типичный” перинуклеарный тип характеризуется гомогенным, кольцевидным окрашиванием перинуклеарной цитоплазмы. Показано, что основным антигеном для п-АНЦА является миелопероксидаза. Таким образом, ц-АНЦА и типичные п-АНЦА взаимодействуют преимущественно с цитоплазматическими антигенами. Указанные типы АНЦА – это хорошо известные маркеры первичных васкулитов.

Существует также третий тип свечения АНЦА, называемый “атипичным” перинуклеарным типом. Этот тип характеризуется неоднородным, широким, кольцевидным свечением периферической части ядра с множественными внутриклеточными включениями. Таким образом, в отличие от ц-АНЦА и типичных п-АНЦА, атипичные п-АНЦА взаимодействуют преимущественно с ядерными, а не с цитоплазматическими антигенами. Какой-либо специфический антиген для атипичных п-АНЦА, однако, до сих пор не найден.

Следует помнить, что клиническое значение атипичных п-АНЦА отличается от типичных п-АНЦА. Говоря о п-АНЦА при ВЗК (особенно при НЯК), имеют в виду именно атипичные п-АНЦА (но не типичные п-АНЦА). Часто эти антитела путают.

Так как антиген для атипичных п-АНЦА не выявлен, РНИФ остается единственным способом их выявления. Для сравнения: после того как было установлено, что в большинстве случаев антигеном для типичных п-АНЦА является миелопероксидаза, были разработаны более точные тест-системы на основе иммуноферментного анализа (ИФА). Сегодня ИФА является обязательным подтверждающим тестом при выявлении типичных п-АНЦА. В случае же с атипичными п-АНЦА такого подтверждающего теста нет.

Атипичные п-АНЦА обнаруживаются в крови 40-80% пациентов с НЯК и 5-25% пациентов с БК. Эти антитела также могут быть выявлены при других видах колита (например, эозинофильном и коллагенозном колите), других аутоиммунных заболеваниях (например, при первичном склерозирующем холангите – до 88%, и аутоиммунном гепатите I типа – до 81%). У здоровых людей атипичные п-АНЦА встречаются редко (1-3%).

2. Антитела к Sacchаromyces cerevisiae

Антитела к Sacchаromyces cerevisiae (ASCA) – антитела, направленные преимущественно против фосфопептидоманнана (компонента клеточной стенки, включающего маннозу) пекарских дрожжевых грибов Sacchаromyces cerevisiae. Манноза входит в состав не только пекарских дрожжевых грибов, но также и некоторых микобактерий и других микроорганизмов (например, дрожжеподобных Candida albicans). До сих пор патофизиологическая роль ASCA не до конца ясна.

Чаще ASCA обнаруживаются у пациентов с БК (50-80% случаев), чем у пациентов с НЯК (2-14%). Распространенность ASCA гораздо выше среди пациентов со спорадическими случаями БК и в семьях только с БК (63%), чем в семьях с БК и НЯК (около 33%).

По структуре ASCA относятся к иммуноглобулинам IgG и IgA классов. Приблизительно у 2/3 пациентов с БК и положительным результатом ASCA IgG также определяются ASCA IgA. До 20% пациентов с БК имеют только ASCA IgA, что объясняет необходимость исследовать оба класса антител.

ASCA также могут быть выявлены при других аутоиммунных заболеваниях (например, при аутоиммунном гепатите – до 20%, болезни Бехчета, первичном билиарном циррозе) и других заболеваниях кишечника (например, при целиакии). У здоровых людей ASCA встречаются редко (1-7%).

Из-за недостаточно высокой чувствительности и специфичности диагностическая роль отдельных тестов п-АНЦА и ASCA несколько ограничена. Большее значение имеет комбинация этих тестов. Результат ASCA+/атипичные п-АНЦА- более характерен для БК, в то время как результат ASCA-/атипичные п-АНЦА+ – для НЯК.

В нескольких исследованиях показано, что комбинация двух тестов позволяет различить НЯК и БК с чувствительностью 30-64% и специфичностью более 90%. Следует отметить, что отрицательный результат каждого теста в отдельности или в комбинации не позволяет полностью исключить ВЗК. Также наличие указанных антител в отдельности или в комбинации не позволяет со 100% уверенностью подтвердить диагноз ВЗК. Результат этого комплексного анализа оценивают с учетом всех значимых клинических, лабораторных и инструментальных исследований.

Для чего используется исследование?

• Для дифференциальной диагностики болезни Крона и неспецифического язвенного колита.

Когда назначается исследование?

• При наличии симптомов воспалительного заболевания кишечника (ВЗК): диареи с примесью крови или слизи/констипации, боли в области живота, тенезмов, тошноты и рвоты, потери веса, лихорадки, анемии;
• при обследовании пациента с отягощенным наследственным анамнезом по болезни Крона или неспецифическому язвенному колиту.

Что означают результаты?

Референсные значения

Антитела к цитоплазме нейтрофилов, IgG (с определением типа свечения)

Титр: менее 1:40.

Результат: не обнаружено.

Антитела к Sacchаromyces cerevisiae (ASCA) классов IgA

0 – 20 RU/ml.

Антитела к цитоплазме нейтрофилов класса IgA (АНЦА)

Положительный результат:

Характерная комбинация аутоантител при БК и НЯК:

Отрицательный результат:

• норма.

Что может влиять на результат?

• ASCA чаще выявляются в спорадических случаях болезни Крона или в семьях только с БК и реже в семьях с БК и НЯК.



Важные замечания

• ASCA могут быть выявлены у 1-7% здоровых людей, атипичные п-АНЦА – у 1-3%;
• результат исследования следует оценивать с учетом анамнестических, лабораторных и инструментальных данных.

Также рекомендуется

[02-007] Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)

[02-001] Анализ кала на скрытую кровь

[02-009] Копрограмма

[06-182] С-реактивный белок, количественно (метод с нормальной чувствительностью)

[13-071] Диагностика воспалительных заболеваний кишечника (антитела к бокаловидным клеткам кишечника и протокам поджелудочной железы)

Кто назначает исследование?

Гастроэнтеролог, врач общей практики, педиатр.

Литература

1. Papp M, Norman GL, Altorjay I, Lakatos PL. Utility of serological markers in inflammatory bowel diseases: gadget or magic? World J Gastroenterol. 2007 Apr 14;13(14):2028-36.
2. Iskandar HN, Ciorba MA. Biomarkers in inflammatory bowel disease: current practices and recent advances. Transl Res. 2012 Apr;159(4):313-25.
3. Lewis JD. The utility of biomarkers in the diagnosis and therapy of inflammatory bowel disease. Gastroenterology. 2011 May;140(6):1817-1826.e2.