Исследование напряженности иммунитета к кори

   Введение

    Антропонозные вирусные инфекции с аэрозольным механизмом передачи составляют большую группу заболеваний в инфекционной патологии. К ним относят такие инфекции, как корь, краснуха, эпидемический паротит и ветряная оспа. Издавна они считаются детскими инфекциями и инфекциями организованных коллективов. В настоящее время отмечается их «повзросление», они все чаще встречаются среди взрослого населения. Этими инфекциями болеют повсеместно на всей территории Российской Федерации и дети, и взрослые.
    Начиная с 1994 г. наблюдалось снижение заболеваемости корью. В 2005–2012 гг. уровень заболеваемости корью на территории России не превышал 1 случай на 100 тыс. населения. Однако в 2012 г. отмечен подъем заболеваемости кори как в Европейском регионе, так и на территории Российской Федерации. Подъем заболеваемости достиг пика в 2014 г. (3,23 на 100 тыс. населения). К 2016 г. показатели заболеваемости снизились и составили 0,12 на 100 тыс. населения. В 2017 г. на территории Российской Федерации зарегистрировано 725 случаев кори. Заболеваемость совокупного населения корью в России в 2017 г. составила 0,50 на 100 тыс. населения. Заболеваемость детского населения до 17 лет составила 1,63 на 100 тыс. населения (в 2016 г. — 0,35 на 100 тыс.). Заболеваемость корью на территории России в 2018 г. возросла в 4,5 раза по сравнению с аналогичным периодом предыдущего года. Наиболее высокая заболеваемость отмечалась среди детей раннего возраста, в возрастной группе 1–2 года — 4,9 на 100 тыс. детей данного возраста (189 случаев) [1].
    Ситуация по кори в мире и в странах Европы остается неблагополучной. В 2017 г. отмечен многократный рост заболеваемости в Европейском регионе. Так, в январе 2017 г. в европейских странах (Германия, Италия, Польша, Румыния, Франция, Швейцария) зарегистрировано 474 случая кори. Кроме того, крупные вспышки кори зарегистрированы в Италии и Румынии [1, 2]. Учитывая усилия, предпринимающиеся по ликвидации кори согласно программе ВОЗ, ситуацию нельзя считать благополучной. Одним из основных мероприятий по профилактике кори является вакцинация с применением живой коревой вакцины (первая вакцинация в возрасте 12 мес., ревакцинация в 6–7 лет). Подлежат вакцинации дети от 1 года до 18 лет (включительно) и взрослые до 35 лет (включительно), неболевшие, непривитые, привитые однократно, а также не имеющие сведений о прививках против кори. Лица, которые относятся к группам риска, подлежат вакцинации до 55 лет. По рекомендациям ВОЗ охват прививками населения должен составлять более 95% от вакциноуправляемых инфекций [3, 4].
    Ветряная оспа — самая распространенная детская инфекция и по количеству случаев уступает лишь острым респираторным инфекциям. Ветряная оспа вызывается вирусом Varicella zoster (VZV), который относится к типу 3 вирусов герпеса и вызывает два заболевания: ветряную оспу и опоясывающий герпес. После перенесенной в детстве инфекции в ганглиях задних корешков спинного мозга формируется пожизненное носительство вируса в дремлющем состоянии. В момент ослабления клеточного звена иммунной системы под влиянием факторов внешней среды, психоэмоциональной перегрузки происходит реактивация вируса, которая клинически проявляется в виде опоясывающего герпеса. Кроме того, ветряная оспа может представлять опасность для лиц, составляющих группу риска (беременные, недоношенные и маловесные дети со стойкими иммунологическими дефектами, а также лица с ВИЧ-инфекцией). Дети с онкологическими заболеваниями наиболее предрасположены к заболеванию ветряной оспой [5, 6]. Показатель заболеваемости ветряной оспой на территории России в 2017 г. составил 585,21 на 100 тыс. населения (в 2016 г. — 544,59 на 100 тыс. населения). Среди детского населения в 2017 г. зарегистрировано 2831,61 случая на 100 тыс. населения (в 2016 г. — 2673,31 на 100 тыс.). Показатель заболеваемости ветряной оспой среди взрослого и детского населения в 2017 г. на территории России увеличился на 7,7% и 5,9% соответственно. За 2017 г. было зарегистрировано 4 случая смерти от ветряной оспы, из них 3 случая — дети [7].
    Показатель заболеваемости эпидемическим паротитом в 2017 г. составил 3,03 на 100 тыс. населения. По сравнению с 2016 г. (0,76 на 100 тыс. населения) заболеваемость возросла в 4 раза. Среди детского населения (возраст до 17 лет) заболеваемость эпидемическим паротитом увеличилась в 3,3 раза. Эпидемический паротит распространен повсеместно. К данному заболеванию восприимчивы как дети, так и взрослые. Вирус поражает околоушные железы. По данным литературы, у 61,9% больных отмечается двустороннее поражение желез. Тяжелое течение заболевания может привести к таким осложнениям, как орхит, панкреатит и менингит. Кроме того, перенесенный в детстве паротит может вызвать развитие сахарного диабета [5, 8].
    На данный период времени эпидемическая обстановка по краснухе благоприятная. В 2017 г. было зарегистрировано пять случаев краснухи среди совокупного населения России. Синдрома врожденной краснухи на территории России не зарегистрировано.
    Единственным эффективным средством профилактики против кори, краснухи, эпидемического паротита и ветряной оспы является вакцинация как детей, так и взрослых. Вакцинация против кори, краснухи и эпидемического паротита внесена в национальный календарь профилактических прививок. В соответствии с приказом Минздрава России от 21 марта 2014 г. № 125н «Об утверждении национального календаря профилактических прививок и календаря прививок по эпидемическим показаниям» вакцинация против ветряной оспы проводится только по эпидемическим показаниям. В 2009 г. вакцинация против ветряной оспы внесена в региональный календарь прививок г. Москвы и Свердловской области.
    Вирусные инфекции, особенно вовлекающие в патологический процесс кожу, могут послужить триггером для запуска или фактором обострения аллергопатологии, тогда как вовремя и правильно проведенная вакцинация живыми вирусными вакцинами практически не дает таких последствий [9].
    Цель исследования: проанализировать напряженность популяционного иммунитета к вирусу кори, краснухи, эпидемического паротита и ветряной оспы на примере 93 здоровых взрослых в возрасте 18–30 лет.

   Материал и методы

Материалом для исследования напряженности иммунитета против кори, краснухи, эпидемического паротита и ветряной оспы послужила сыворотка крови 93 случайно выбранных условно здоровых человек в возрасте 18–30 лет. Дополнительно у всех был собран прививочный анамнез.
    Сведения о вакцинации получены из личных медицинских книжек. Так, у 61 человека не было сведений о прививках против кори, у 29 — такие сведения имелись, из них у 21 — прививка проводилась в возрасте 6–7 лет, у 4 — в возрасте 1 года. У 3 человек было лишь указано, что они привиты по возрасту от кори, но без указания даты вакцинации.
    У 66 человек прививочный статус в отношении краснухи был неизвестен. У 27 человек такие сведения имелись, из них у 12 — о вакцинации в возрасте 11–12 лет, у 7 — о вакцинации по возрасту без указания даты.
    У 65 обследованных прививочный статус относительно эпидемического паротита был неизвестен. У 28 человек такие сведения имелись, из них у 4 — сведения о первой прививке в возрасте 1 года, у 15 — в возрасте 6–7 лет и только у 7 — о прививках по возрасту без указания даты.
    Относительно ветряной оспы у 83 человек прививочный статус был неизвестен. У 10 человек такие сведения имелись, из них у 5 — сведения о вакцинации в возрасте от 3 до 5 лет. Один человек привит в возрасте 14 лет, и 4 человека привиты по возрасту без указания даты вакцинации.
    Забор крови осуществляли из локтевой вены в количестве 4 мл. Сыворотку крови, полученную для определения специфического иммунитета, разливали в пробирки типа «эппендорф», замораживали и хранили до использования при температуре -70 °С. Специфические иммуноглобулины класса G (IgG) к антигенам вирусов кори, краснухи, эпидемического паротита и ветряной оспы в сыворотке крови определяли методом иммуноферментного анализа (ИФА) с помощью тест-систем (Россия) в соответствии с прилагаемой инструкцией производителя. Защитным уровнем IgG для кори считали показатель 0,2 МЕ/мл, для краснухи — 25 МЕ/мл [10]. Для оценки уровня специфических антител к вирусам эпидемического паротита и ветряной оспы рассчитывали коэффициент позитивности, равный отношению полученного для каждой сыворотки значения в единицах оптической плотности к уровню cut off.
    Полученные результаты были подвергнуты статистической обработке с вычислением медианы, первого и третьего квартиля (пакет статистических программ Microsoft Office Excel 2010).

   Результаты и обсуждение

    По результатам ИФА получили процентное выражение защищенности в зависимости от уровня специфических IgG к антигенам вирусов кори, краснухи, эпидемического паротита и ветряной оспы, которое представлено на рисунке 1.

    Специфические IgG к вирусу ветряной оспы были обнаружены у 87% обследованных, что может свидетельствовать о перенесенной инфекции в раннем возрасте. Кроме того, отмечен высокий уровень защиты против краснухи — 96% и эпидемического паротита — 87%, что свидетельствует о наличии специфического иммунитета в результате вакцинации или перенесенной инфекции. У 43% обследованных отмечены высокие уровни антител к вирусу краснухи, что может говорить о перенесенной ранее инфекции (у данных пациентов уровень антител был 300 Ме/мл и выше, что возникает именно в случае перенесенной инфекции). В таблице 1 представлены средние уровни противовирусных антител к вирусам рассматриваемых инфекций. Средний уровень антител к вирусу краснухи, эпидемического паротита и ветряной оспы в индикаторной группе (18–30 лет) превышает защитный уровень. Критерием эпидемиологического благополучия по краснухе считается выявление в обследованной группе не более 7% серонегативных лиц, для эпидемического паротита — 5%. Доля восприимчивых к инфекции краснухи составила 3%, к паротиту — 10%, что соответствует критериям эпидемиологического  благополучия по данным инфекциям.

    По полученным результатам можно сказать, что обследованная группа имеет низкую восприимчивость к вирусу краснухи и вирусу эпидемического паротита. Аналогичные результаты получены в отношении вируса ветряной оспы (13% серонегативных) преимущественно за счет перенесенного заболевания, т. к. только 10 человек из обследованной группы были привиты против ветряной оспы.
    Другая ситуация складывается с корью: доля серонегативных составила 56% (52 человека) из 93 обследованных. Следы специфических антител (но ниже защитного уровня) имели 13% из обследованных. И лишь 31% имели защитные уровни в результате вакцинации. Один человек был выявлен с титром антител 2,10 МЕ/мл, что может свидетельствовать о перенесенной инфекции. Средний уровень противокоревых антител оказался ниже защитного уровня. Критерием эпидемического благополучия по кори считается выявление в обследуемой группе не более 7% серонегативных лиц. В нашем случае 69% обследованных оказались не защищенными от вируса кори. Таким образом, эти лица составляют группу высокого риска инфицирования и распространения инфекции кори.
    При анализе прививочного статуса было выявлено, что у большинства обследованных отсутствовали сведения о прививках. Причины этого могут быть различными: небрежное оформление документов и утеря медицинских документов, отказ от прививок, медицинские отводы. Часть обследованных имеют сведения о вакцинации, но по результатам серологического мониторинга титр специфических антител IgG у них ниже защитного уровня. Причинами этого несоответствия могут быть нарушение «холодовой цепи» в пути транспортировки вакцины от изготовителя до вакцинируемого или нарушение сроков вакцинации. Такие люди считаются привитыми, но не имеют защитного титра.

   Заключение

    С 2011 г. отмечается рост заболеваемости корью в Российской Федерации, одна из причин ухудшения ситуации — накопление в популяции восприимчивых (неиммунных) лиц на фоне выраженной миграции населения. Одним из достоверных методов оценки иммунной прослойки населения является серомониторинг (определение IgG у здоровых лиц). Результаты серологических исследований показывают, был ли человек привит, или не привит, или перенес инфекцию ранее. Такой метод дает достоверный материал для анализа напряженности коллективного иммунитета на популяционном уровне, кроме того, позволяет прогнозировать дальнейшую эпидемическую ситуацию в стране [10, 11]. На сегодня растет количество отказов родителей от профилактических прививок. По данным проведенных исследований выявлено, что лишь 80% детей привиты в возрасте до 2 лет [3]. Правильно и вовремя сделанная прививка живыми вирусными вакцинами не вызывает обострения имеющейся аллергопатологии и не провоцирует формирование новой [9]. В то же время вирусные инфекции, вовлекающие в воспалительный процесс кожу и респираторный тракт, могут послужить как фактором обострения аллергопатологии, так и непосредственным триггером, запускающим аллергический процесс. Необходимо повышать информированность родителей по вопросам вакцинопрофилактики путем проведения разъяснительных работ, а медицинского персонала — путем образовательных семинаров и лекций.

Корью называется острая инфекция вирусной природы, которая может сопровождаться такими тяжелыми симптомами, как пневмония, температура равная 39–41 °C, воспаление верхних дыхательных путей, общая слабость, экзантема и т. д. В некоторых случаях люди становятся инвалидами или же погибают от осложнений.

Согласно медицинским данным, иммунитет к кори имеет возможность полноценно сформироваться лишь после фактического перенесения человеком недуга, а прививки в подавляющем большинстве случаев не только не способствуют образованию антител по отношению к вирусу, но и нередко ослабляют защитные барьеры организма. Для того чтобы выявить инфекционную болезнь, а также подтвердить наличие или отсутствие должной иммунной реакции на нее, специалисты применяют анализ крови на антитела к кори. В чем же состоит его особенность?

Значимость антител для человека

Когда вирус кори (морбилливирус), преодолевая естественные защитные барьеры организма, попадает во внутреннюю среду, он придается активному размножению и распространению. В это же время иммунная система производит необходимое количество защитных белков – антител: вырабатываемые структуры обнаруживают инородные клетки, входят с ними в контакт и купируют их развитие. Если организм изначально имел в наличии большое количество иммуноглобулинов, то процесс его очистки от враждебных тел пройдет как можно быстрее без каких-либо осложнений.

Принцип действия защитной реакции на вирусное вторжение основывается на так называемой системе «замочка и ключика». Иммунитет не только продуцирует необходимое количество антител, но и придает им уникальную структуру, которая позволяет оборонительным белкам подобно ключам «встраиваться» в соответствующие скважины замочков инфекционных агентов и подвергать их ликвидации.

Также следует отметить хорошую память белков: столкнувшись ранее с врагом, они навсегда запоминают их «внешний вид», что позволяет им при повторной попытке захвата моментально среагировать на опасность, ликвидируя болезнь еще до её начала. А поскольку возбудитель кори не подвергается практически никаким изменениям, «лицо» вируса будет на протяжении всей жизни человека идентифицироваться его защитной системой и незамедлительно атаковываться.

Так как чаще всего во время первого заболевания корью антитела вырабатываются организмом не столь быстро, во время иммунной реакции повышается вероятность заражения окружающих людей воздушно-капельным путем.

Детальное строение морбилливируса – возбудителя кори

В каких случаях проводится исследование?

Анализ крови на соответствующие иммуноглобулины делается, в первую очередь, людям, у которых во время комплексного обследования были диагностированы подобные симптомы или совокупность таковых:

• Боли в области горла.
• Слезотечение.
• Сухой кашель.
• Лихорадка.
• Стоматит.
• Конъюнктивит.
• Зудящая сыпь на поверхности кожного покрова.
• Температура, поднимающаяся выше 38-39° C.
• Покраснение глаз.
• Боязнь света.
• Тахикардия.
• Пристеночное дыхание.
• Истощение организма.
• Ангина.
• Эпидермальная пигментация.
• Потеря аппетита.
• Интоксикация.
• Артериальная гипотензия (пониженное АД).
• Гиперемия.
• Чихание.
• Отечность век.
• Отит.
• Красноватые и белесые пятна на нёбе.
• Непрекращающиеся головные боли.
• Суставная боль.
• Ринит (насморк).
• Видоизменение голоса, его осиплость.
• Энцефалит.
• Выраженные хрипы при дыхании.

СПИД, значительно ослабевая иммунную систему человека, нередко способствует беспрепятственному проникновению морбилловируса в организм. Исследование крови на напряженность иммунитета к кори часто просят сдать детей и подростков при введении карантинного режима на территории учебных учреждений. Помимо прочего, существуют так называемые факторы риска, которые тоже могут способствовать назначению анализа на иммуноглобулины.

Если говорить о том, сколько их существует на данный момент, стоит выделить наиболее значимые из них:

• Проживание в условиях крайней антисанитарии.
• Посещение государств, в которых вирусное заболевание является распространенным явлением.
• Общее снижение уровня иммунитета.

Люди, страдающие от последствий дефицита витамина A, также попадают в группу риска: на фоне признаков авитаминоза (куриной слепоты, сухости кожи и пр.) у них могут параллельно проявляться симптомы опасной инфекции. Поэтому при хроническом недостатке ретинола следует немедленно посетить врача с целью восстановления защитных барьеров организма.

Следует помнить о том, что кори в большинстве случаев подвергаются те, кто напрямую контактировал с больными людьми.

Подготовка к анализу

Подготовка к диагностике титров нарастания антител подразумевает всего несколько крайне важных требований. Следует минимум за сутки до исследования минимизировать тяжелые физические нагрузки. За 2 недели до того, как сдавать кровь на корь, требуется обязательная консультация со специалистом относительно дальнейшего употребления каких-либо лекарственных средств. Необходимо постараться удерживать положительный психологический настрой, не поддаваясь панике и стрессу.

За 24–48 часов стоит исключить распитие энергетиков и алкогольных напитков. Нужно отложить на полноценный сон накануне диагностики примерно 7–8 часов – на прием к врачу следует приходить выспавшимися и отдохнувшими. За 8–10 часов до анализа крови рекомендуется употребить последний прием пищи: сбор биоматериала осуществляется на пустой желудок.

Медики советуют не проходить лабораторное исследование сразу после каких-либо физиотерапевтических процедур, колоноскопии, МРТ, рентгена, компьютерной томографии или флюорографии. Последний прием еды перед исследованием должен быть максимально простым и нежирным: лучше всего приготовить крем-суп, запеченные овощи или легкий салат. Когда до медицинской манипуляции останется 10–20 минут, пациенту потребуется присесть на свободную скамью в коридоре и немного передохнуть после спешной дороги.

Техника проведения

Для того чтобы диагностика показала достоверный результат, а также не нанесла урон здоровью человека, её следует выполнять согласно установленным инструкциям, предполагающим следующий порядок действий:

• Пациент заходит в оборудованное помещение и усаживается на кушетку, располагающуюся около манипуляционного столика.
• Специалист подготавливает необходимые стерильные ёмкости, маркирует их, указывая также личные данные конкретного человека и подписывает направление в лабораторию, с дальнейшим занесением очередной заметки в журнал.
• Одну из рук пациента укладывают в разогнутом состоянии на стол так, чтобы ладонь была направлена к потолку, кладут под локоть небольшой валик.
• На нижнюю часть плеча накладывают жгут из резины или иной материи, проверяя наличие пульса близь запястья.
• Кожу над локтевой веной обрабатывают с помощью медицинского спирта, затем просят пациента интенсивно чередовать сжимания и разжимания кулака для лучшего насыщения сосудов кровью.
• Когда игла вакуумной системы или одноразового шприца будет введена в вену под углом в 25 градусов, лаборант аккуратно подкорректирует направление иглы, расположив её параллельно сосудистым стенкам.
• Далее производится забор необходимого количества крови, которая должна обладать бордовым (темно-красным) оттенком.
• К месту прокола прижимают ватный диск, одновременно извлекая из вены иглу, после чего с плеча снимают жгут.
• На протяжении минимум 5 минут пациенту нужно неподвижно держать руку в согнутом состоянии, для того чтобы в области пункции образовался тромб (кровяной сгусток): он закупорит сосуд и предотвратит дальнейшую потерю крови.

Если локтевая вена при первичном осмотре практически не наблюдается (т.е. глубоко залегает), тогда специалист может взять пробу из вен нижней части конечности: кисти или запястья.

Схема забора биоматериала из вены

Специфика лабораторного исследования

Данный анализ крови на корь предполагает исследование двух типов иммуноглобулинов – M и G. Антитела первого типа вырабатываются иммунной системой в острой фазе инфекционного заболевания. На протяжении последующего месяца их уровень значительно повышается, а потом начинает падать, стремясь к нулю. Можно сказать, что IgM является непостоянным параметром, проявление которого сигнализирует о наличии возбудителя кори. После излечения, эта белковая структура исчезает.

Иммуноглобулин G появляется следом за IgM, его концентрация также начинает временно увеличиваться до определенной отметки. В отличие от своего собрата IgG, после перенесения человеком вирусной патологии, остается в крови на постоянной основе, свидетельствуя о том, что пациент когда-то заболевал инфекцией и в последствие приобрел стойкий иммунитет к кори. Крайне часто по окончании лабораторного исследования на руки пациенту выдают 2 бланка результатов

Дело в том, что врачи предпочитают подходить к важному обследованию комплексно, поэтому в большинстве случаев серологическая диагностика иммуноглобулинов производится в совокупности с общим анализом крови. ОАК позволяет специалистам выявить корь по состоянию наиболее значимых элементов крови – моноцитов, лимфоцитов, нейтрофилов, эозинофилов, лейкоцитов, тромбоцитов и эритроцитов. Последние форменные элементы в письменной расшифровке анализа скрываются под термином СОЭ – скоростью оседания эритроцитов.

Принципы расшифровки результатов

Анализ крови на иммуноглобулины не имеет классических стандартов содержания IgG и IgM, так как каждая лаборатория устанавливает собственные параметры нормы. Как правило, допустимые значения антител указаны в бланке рядом с результатами диагностики, поэтому пациент сам может методом сравнения установить частичный диагноз. Если цифирные обозначения личных данных ниже нормы – речь идет об отрицательном показателе, если выше нормы – тогда о положительном.

Рядом с каждым параметром для удобства можно аккуратно нарисовать «+» или «-» в зависимости от вычислений, затем приступить к сопоставлению результатов:

В результатах общего анализа крови при кори будет наблюдаться снижение количества нейтрофилов, лейкоцитов, моноцитов, эозинофилов (могут отсутствовать) и лимфоцитов. Показатель СОЭ, в свою очередь, немного повышен. Анализы крови на антитела к кори никогда, при правильном подходе к обследованию, не берутся самостоятельно в отсутствии уточняющих методов диагностики.

Поэтому до окончательного объявления диагноза не следует поддаваться тревожным ощущениям. Если пациент будет выполнять предписания специалиста, следовать намеченному плану лечения и восстановления, тогда вероятность благоприятного исхода повышается в несколько раз.